Коррекция иммунного статуса и повышение эффективности диагностики лейкоза у крупного рогатого скота
Новосельцев Г.Г. ГБУ КК "Управление ветеринарии Гулькевичского района"
Черных О.Ю. ГБУ КК "Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория"
Прижизненная диагностика лейкоза крупного рогатого скота осуществляется с использованием иммунологических реакций (РИД, ИФА), гематологических и генетических исследований с помощью ПЦР [1, 2, 7, 8]. По результатам исследований при исользовании упомянутых реакций не представляется возможным выявить одномоментно всех инфицированных или гематологически больных животных. Это связано с особенностями развития и проявления инфекционного процесса и иммунологической реактивности животных. Эти процессы тесно взаимосвязаны, взаимообусловлены, противоположны, характеризуются взаимоисключением и определяются комплексом генотипических и паратипических факторов.
Серологические исследования молодняка проводятся с 6-ти месячного возраста и предусматриваются лишь в комплексах по выращиванию нетелей и племенных животных, а так же в хозяйствах, занимающихся реализацией поголовья. В неблагополучных хозяйствах, при инфицированности стада 30% и более, серологические исследования действующими правилами не предусматриваются.
Важной особенностью инфекционного процесса при лейкозе крупного рогатого скота является и то, что в период беременности имеет место внутриутробное инфицирование. Считается, что через плаценту в пренатальный период инфицируется 3-20% плодов, причем, частота зависит от уровня инфицированности коров-матерей, а более высокий процент пренатальной передачи отмечали у телят, родившихся от коров с клинико-гематологическим и опухолевым проявлением лейкоза [4, 9].
У новорожденных животных при внутриутробном инфицировании или заражении в период новорожденности наблюдается иммунологическая толерантность [3]. Состояние ареактивности трудно диагностируется, хотя такие животные надолго остаются в стаде и являются источником возбудителя в течение длительного промежутка времени.
В связи с тем, что вирус лейкоза обладает иммунодепрессив-ными свойствами и не исключается возможность внутриутробного инфицирования потомства весьма важно осуществлять раннюю и достоверную диагностику тёлок.
Целью нашей работы явилась оценка эффективности применения ронколейкина для коррекции иммунного статуса и повышения достоверности серологической диагностики лейкоза у молодняка крупного рогатого скота.
Методологической основой планируемых исследований явилось то, что вирус лейкоза крупного рогатого скота не только индуцирует иммунодефициты, а потомство инфицированных коров характеризуется признаками пониженной жизнеспособности, но и в крови инфицированных вирусом лейкоза коров в 34 % случаев обнаруживается вирус иммунодефицита [7].
Гипотеза исследований - если применение ронколейкина обеспечит коррекцию иммунной системы, то результаты иммунологической диагностики (серологического тестирования) будут более достоверными.
Объектом исследований служили телки 6-ти месячного возраста до и после коррекции иммунной системы предлагаемым препаратом. Исследования проводились в неблагополучных хозяйствах Гулькевич-ского района Краснодарского края.
Для исследования были отобраны животные (потомство) от инфицированных, интактных и гематологически больных коров, у которых диагноз был поставлен при контрольном убое. Для исследований были подобраны четыре группы животных по 15 голов 6 - ти месячного возраста:
первая группа - серонегативные телки, потомство коров виру-соносителей;
вторая группа - нетестированное потомство инфицированных коров;
третья группа - нетестированное потомство, не подвергавшееся иммунной коррекции;
четвертая группа - потомство гематологически больных коров. Все группы животных, за исключение третьей, подвергались иммунной коррекции.
Наблюдения за животными и серологическое тестирование проводилось ежеквартально (в 6, 9, 12-ти месячном возрасте).
Ронколейкин применялся за 20 дней до серологических исследований подкожно в дозе 1000МЕ на кг двукратно с интервалом 24 часа. Исследования проводились в Кропоткинской краевой ветеринарной лаборатории. Серологическое тестирование осуществлялось с использованием иммуноферментного анализа и реакции иммуно-диффузии.
По результатам проведенных исследований (табл. 1) самый высокий процент животных (50), реагирующих позитивно в реакции иммунодиффузии, выявлен в четвёртой группе, которая представлена потомством гематологически больных коров. Это объясняется тем, что вероятность трансплацентарной и конгенитальной передачи вируса у гематологически больных коров значительно выше, чем у инфицированных.
Таблица 1. Результаты серологического тестирования молодняка крупного рогатого скота на лейкоз
Группы животных |
Исследовано, кол-во голов |
Выявлено реагирующих животных (%) в возрасте |
Примечание |
||
---|---|---|---|---|---|
6 месяцев |
9 месяцев |
12 месяцев |
|||
1 и 2* |
30 |
6,6 |
16,6 |
16,6 |
Потомство инфицированных коров |
3 |
15 |
25,0 |
25,0 |
33,3 |
Потомство интактных коров |
4* |
12 |
50,0 |
50,0 |
- |
Потомство гембольных коров |
Примечание: * животные 1, 2 и 4 группы за 20 дней до исследований подвергались целенаправленной коррекции ронколейкином.
У животных первой и второй групп уровень инфицированности в 6-ти месячном возрасте составил 6,6 %, а в последующие месяцы 16,6 %.
Среди потомства интактных коров (третья группа) в возрасте 6 и 9 месяцев процент серопозитивных животных составил 25,0, а в 12-ти месячном возрасте 33,3%.
При анализе результатов применения рон-колейкина согласно методики было установлено, что среди животных 1, 2 и 3 групп самый высокий процент серопозитивных зарегистрирован в третьей группе. Так, в первой группе уровень инфици-рованности составил 6,6 %, во второй - 26,6 %, а в третьей - 33,3 %. Поскольку животные третьей группы иммунной коррекции (в отличие от первой и второй групп) не подвергались, то говорить об эффективности диагностики после применения ронколейкина не представляется возможным. Сравнивать результаты серологического тестирования животных 3 и 4 групп нельзя (методически не верно), так как животные четвёртой группы представлены потомством гематологически больных коров.
Таким образом, наша гипотеза о том, что ронколейкин после его применения будет в результате иммунной коррекции повышать эффективность серологической диагностики лейкоза у молодняка крупного рогатого скота не подтвердилась.
Несмотря на это, есть основание полагать, что применение ронколейкина могло стимулировать иммунную систему организма и профилактировало возможность распространения (инфицирования) в условиях совместного содержания животных рождённых инфицированными, интактными и гематологически больными коровами. Доказательством этого положения является то, что за 6 месяцев наблюдения за животными (по результатам серологического контроля), которые подвергались иммунной коррекции, уровень инфицированности в 1 и 2 -ой группах составил 16,6%, а в четвёртой, - не подвергавшейся иммунной коррекции, - 33,3 %.
По результатам диагностических исследований скота различными методами в 2010 году (табл. 3) было установлено, что больший процент инфицированных животных 46,9 выявляется при помощи (ПЦР) полимеразной цепной реакции.
Таблица 2. Результаты исследований крупного рогатого скота на лейкоз с использованием реакций иммунодиффузии (РИД) и иммуноферментного анализа (ИФА) в возрасте 6, 9 и 12 месяцев
Группы животных |
Количество голов |
Методы исследований и результаты |
Процент реагирующих |
||
---|---|---|---|---|---|
РИД |
ИФА |
ИФА |
|||
1 |
15 |
0/15 |
1/14 |
1/14 |
6,6 |
2 |
15 |
2/13 |
4/11 |
4/11 |
26,6 |
3 |
15 |
3/12 |
3/12 |
5/10 |
33,3 |
4 |
12 |
6/6 |
6/6 |
- |
50,0 |
Таблица 3. Анализ результатов диагностических исследований крупного рогатого скота различными методами в 2010 году
етод исследования |
Количество голов |
Результаты исследований |
% реагирующих |
---|---|---|---|
РИД |
427 |
56 / 371 |
13,1 |
ИФА |
419 |
55 /344 |
13,1 |
ПЦР |
32 |
15 /17 |
46,9 |
ГЕМ |
24 |
5/19 |
20,8 |
-
-
-
-
-
Хламидии и коксиеллы в скотоводстве. -
-
-
-
Бруцеллез крупного рогатого скота, диагностика, специфическая профилактика -
Диагностика кетозов у коров -
Сроки вакцинации влияют на выработку молозива -
-
-
-
Фолликулярная киста у коров -
-
-
-
-
-