Новосельцев Г.Г. ГБУ КК "Управление ветеринарии Гулькевичского района"
Черных О.Ю. ГБУ КК "Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория"
Прижизненная диагностика лейкоза крупного рогатого скота осуществляется с использованием иммунологических реакций (РИД, ИФА), гематологических и генетических исследований с помощью ПЦР [1, 2, 7, 8]. По результатам исследований при исользовании упомянутых реакций не представляется возможным выявить одномоментно всех инфицированных или гематологически больных животных. Это связано с особенностями развития и проявления инфекционного процесса и иммунологической реактивности животных. Эти процессы тесно взаимосвязаны, взаимообусловлены, противоположны, характеризуются взаимоисключением и определяются комплексом генотипических и паратипических факторов.
Серологические исследования молодняка проводятся с 6-ти месячного возраста и предусматриваются лишь в комплексах по выращиванию нетелей и племенных животных, а так же в хозяйствах, занимающихся реализацией поголовья. В неблагополучных хозяйствах, при инфицированности стада 30% и более, серологические исследования действующими правилами не предусматриваются.
Важной особенностью инфекционного процесса при лейкозе крупного рогатого скота является и то, что в период беременности имеет место внутриутробное инфицирование. Считается, что через плаценту в пренатальный период инфицируется 3-20% плодов, причем, частота зависит от уровня инфицированности коров-матерей, а более высокий процент пренатальной передачи отмечали у телят, родившихся от коров с клинико-гематологическим и опухолевым проявлением лейкоза [4, 9].
У новорожденных животных при внутриутробном инфицировании или заражении в период новорожденности наблюдается иммунологическая толерантность [3]. Состояние ареактивности трудно диагностируется, хотя такие животные надолго остаются в стаде и являются источником возбудителя в течение длительного промежутка времени.
В связи с тем, что вирус лейкоза обладает иммунодепрессив-ными свойствами и не исключается возможность внутриутробного инфицирования потомства весьма важно осуществлять раннюю и достоверную диагностику тёлок.
Целью нашей работы явилась оценка эффективности применения ронколейкина для коррекции иммунного статуса и повышения достоверности серологической диагностики лейкоза у молодняка крупного рогатого скота.
Методологической основой планируемых исследований явилось то, что вирус лейкоза крупного рогатого скота не только индуцирует иммунодефициты, а потомство инфицированных коров характеризуется признаками пониженной жизнеспособности, но и в крови инфицированных вирусом лейкоза коров в 34 % случаев обнаруживается вирус иммунодефицита [7].
Гипотеза исследований - если применение ронколейкина обеспечит коррекцию иммунной системы, то результаты иммунологической диагностики (серологического тестирования) будут более достоверными.
Объектом исследований служили телки 6-ти месячного возраста до и после коррекции иммунной системы предлагаемым препаратом. Исследования проводились в неблагополучных хозяйствах Гулькевич-ского района Краснодарского края.
Для исследования были отобраны животные (потомство) от инфицированных, интактных и гематологически больных коров, у которых диагноз был поставлен при контрольном убое. Для исследований были подобраны четыре группы животных по 15 голов 6 - ти месячного возраста:
первая группа - серонегативные телки, потомство коров виру-соносителей;
вторая группа - нетестированное потомство инфицированных коров;
третья группа - нетестированное потомство, не подвергавшееся иммунной коррекции;
четвертая группа - потомство гематологически больных коров. Все группы животных, за исключение третьей, подвергались иммунной коррекции.
Наблюдения за животными и серологическое тестирование проводилось ежеквартально (в 6, 9, 12-ти месячном возрасте).
Ронколейкин применялся за 20 дней до серологических исследований подкожно в дозе 1000МЕ на кг двукратно с интервалом 24 часа. Исследования проводились в Кропоткинской краевой ветеринарной лаборатории. Серологическое тестирование осуществлялось с использованием иммуноферментного анализа и реакции иммуно-диффузии.
По результатам проведенных исследований (табл. 1) самый высокий процент животных (50), реагирующих позитивно в реакции иммунодиффузии, выявлен в четвёртой группе, которая представлена потомством гематологически больных коров. Это объясняется тем, что вероятность трансплацентарной и конгенитальной передачи вируса у гематологически больных коров значительно выше, чем у инфицированных.
Таблица 1. Результаты серологического тестирования молодняка крупного рогатого скота на лейкоз
Группы животных | Исследовано, кол-во голов | Выявлено реагирующих животных (%) в возрасте | Примечание | ||
|---|---|---|---|---|---|
6 месяцев | 9 месяцев | 12 месяцев | |||
1 и 2* | 30 | 6,6 | 16,6 | 16,6 | Потомство инфицированных коров |
3 | 15 | 25,0 | 25,0 | 33,3 | Потомство интактных коров |
4* | 12 | 50,0 | 50,0 | - | Потомство гембольных коров |
Примечание: * животные 1, 2 и 4 группы за 20 дней до исследований подвергались целенаправленной коррекции ронколейкином.
У животных первой и второй групп уровень инфицированности в 6-ти месячном возрасте составил 6,6 %, а в последующие месяцы 16,6 %.
Среди потомства интактных коров (третья группа) в возрасте 6 и 9 месяцев процент серопозитивных животных составил 25,0, а в 12-ти месячном возрасте 33,3%.
При анализе результатов применения рон-колейкина согласно методики было установлено, что среди животных 1, 2 и 3 групп самый высокий процент серопозитивных зарегистрирован в третьей группе. Так, в первой группе уровень инфици-рованности составил 6,6 %, во второй - 26,6 %, а в третьей - 33,3 %. Поскольку животные третьей группы иммунной коррекции (в отличие от первой и второй групп) не подвергались, то говорить об эффективности диагностики после применения ронколейкина не представляется возможным. Сравнивать результаты серологического тестирования животных 3 и 4 групп нельзя (методически не верно), так как животные четвёртой группы представлены потомством гематологически больных коров.
Таким образом, наша гипотеза о том, что ронколейкин после его применения будет в результате иммунной коррекции повышать эффективность серологической диагностики лейкоза у молодняка крупного рогатого скота не подтвердилась.
Несмотря на это, есть основание полагать, что применение ронколейкина могло стимулировать иммунную систему организма и профилактировало возможность распространения (инфицирования) в условиях совместного содержания животных рождённых инфицированными, интактными и гематологически больными коровами. Доказательством этого положения является то, что за 6 месяцев наблюдения за животными (по результатам серологического контроля), которые подвергались иммунной коррекции, уровень инфицированности в 1 и 2 -ой группах составил 16,6%, а в четвёртой, - не подвергавшейся иммунной коррекции, - 33,3 %.
По результатам диагностических исследований скота различными методами в 2010 году (табл. 3) было установлено, что больший процент инфицированных животных 46,9 выявляется при помощи (ПЦР) полимеразной цепной реакции.
Таблица 2. Результаты исследований крупного рогатого скота на лейкоз с использованием реакций иммунодиффузии (РИД) и иммуноферментного анализа (ИФА) в возрасте 6, 9 и 12 месяцев
Группы животных | Количество голов | Методы исследований и результаты | Процент реагирующих | ||
|---|---|---|---|---|---|
РИД | ИФА | ИФА | |||
1 | 15 | 0/15 | 1/14 | 1/14 | 6,6 |
2 | 15 | 2/13 | 4/11 | 4/11 | 26,6 |
3 | 15 | 3/12 | 3/12 | 5/10 | 33,3 |
4 | 12 | 6/6 | 6/6 | - | 50,0 |
Таблица 3. Анализ результатов диагностических исследований крупного рогатого скота различными методами в 2010 году
етод исследования | Количество голов | Результаты исследований | % реагирующих |
|---|---|---|---|
РИД | 427 | 56 / 371 | 13,1 |
ИФА | 419 | 55 /344 | 13,1 |
ПЦР | 32 | 15 /17 | 46,9 |
ГЕМ | 24 | 5/19 | 20,8 |
