Микоплазменный мастит и его профилактика

Борьба с микоплазменным маститом может стать в будущем одной из основных проблем, поскольку это относительно редкое заболевание отмечено на каждой пятой молочной ферме США. Так считает профессор Университета штата Вашингтон Лоуренс К. Фокс (Lawrence K. Fox).

Он рекомендует фермерам осуществлять профилактику заболевания путем применения специальных диет и создания соответствующих условий содержания, а также минимизации воздействия новых штаммов.

По мнению профессора Фокса, этого можно добиться при помощи отбора животных и тщательного планирования сроков введения в стадо новых особей.

Введение

Профессор Фокс пишет, что наиболее распространенными возбудителями мастита являются бактерии Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae и Mycoplasma sp., причем две последних разновидности встречаются гораздо реже — ими заражены менее пяти процентов предприятий (APHIS, 2008).

Однако распространенность бактерий Mycoplasma sp. увеличивается, и в США существует вероятность заражения ими более 21% крупных молочных хозяйств с поголовьем свыше 500 коров (APHIS, 2003). По этой причине борьба с микоплазменным маститом становится новой проблемой (Фокс и др., 2003 г.)3.

Последние отчеты подтверждают глобальную значимость этого заболевания, охватившего такие районы, в которых оно ранее не отмечалось, например, Остров Принца Эдуарда, Канада (Олде Рикеринк (Olde Riekerink) и др., 2006 г.), Северная Греция (Филиуссис (Filioussis) и др., 2007 г.), Саудовская Аравия (Аль-Абдалла (Al Abdullah), 2006 г.), Франция (Арканьоли (Arcangioli) и др., 2011 г.), Бельгия (Пассчин (Passchyn) и др., 2011 г.), Мексика (Миранда-Моралес (Miranda-Morales) и др., 2008 г.) и Иран (Газаэи (Ghazaei), 2006 г.).

Учитывая предположение о том, что микоплазменный мастит поражает крупные стада (Пинхо (Pinho), 2012 г., APHIS, 2008 г.; Фокс и др., 2008 г.; Томас (Thomas) и др., 1981 г.) и что с течением времени численность поголовья возросла, представляется логичным заключить, что микоплазменный мастит стал более распространенным.

Это может стать очень существенным фактором риска, ведь в западных штатах США находятся крупнейшие в стране молочные фермы (APHIS, 2009 г.), это регион, где молочное животноводство развивается наиболее активно, особенно с точки зрения численности молочных стад.

Джаспер (Jasper) выделил два основных фактора риска для молочных стад в связи с развитием микоплазменного мастита (Джаспер, 1981 г.): (1) введение больных животных в стадо, в котором есть лактирующие коровы, и (2) проблемы, связанные с организацией доения, несоблюдение санитарно-гигиенических требований. Современные исследователи отмечают, что несоблюдение гигиенических требований в процессе доения не является непосредственной причиной возникновения микоплазменного мастита, однако источником инфекции может быть скот, пораженный немаститными микоплазменными заболеваниями (Пуньяпорнвитхайя (Punyapornwithaya) и др., 2010–2011 гг.).

Таким образом, цель данной работы заключается в рассмотрении ранее предложенных гипотез о том, что микоплазменный мастит передается в основном возбудителями мастита во время доения, и более поздних утверждений, связывающих вспышки микоплазменного мастита с симптомным и бессимптомным переносом бактерий Mycoplasma sp. животными. Также в статье приводится краткий обзор проблемы диагностики микоплазменного мастита.

Диагноз

Как отмечает профессор Фокс, простой геном и сложные питательные потребности для роста бактерий Mycoplasma sp. могут объяснять их медленную репликацию и затруднять их обнаружение во многих лабораториях диагностики мастита. Учитывая особенности культуры Mycoplasma sp., ученые предположили, что обычные методы диагностики могут не подойти для определения микоплазменного мастита.

Диагностика микоплазменного мастита осуществляется, как правило, на основе микробиологических методов (Гонсалес (Gonzalez) и Уилсон (Wilson), 2003 г.). Для предварительного выделения бактерий Mycoplasma sp. в молоке рекомендуется посев в модифицированной питательной среде Хейфлика, инкубированный при температуре 37°C в присутствии 10% CO2 в течение 7–10 дней (Хоган (Hogan) и др., 1999 г.). Разработаны также и другие методы, такие как иммунологический анализ на выявление специфических антигенов и анализ нуклеиновых кислот (по методу ПЦР) (Фокс и др., 2005 г.).

Использование ПЦР может быть перспективным (Жустис-Аллан (Justice-Allen) и др., 2012 г., Пинхо и др., Бунияйатра и др., 2012а), но для диагностики по-прежнему обычно проводится на основе культурального метода. Преимущество некультуральных методов заключается в том, что они позволяют распознавать разные виды. Mycoplasma bovis рассматривается, как правило, как патогенный штамм, поражающий крупный рогатый скот, однако следует помнить о существовании и других штаммов (Фокс и др., 2012 г.).

Существует вероятность получения ложноположительных результатов по той причине, что в патогенных штаммах могут присутствовать микоплазмоподобные микроорганизмы, моликуты. Наиболее распространенными непатогенными моликутами являются бактерии Acholeplasma sp., отличить которые от Mycoplasma sp. можно при помощи анализов на дигитонин и низин на основе культурального метода (Бунияйатра и др., 2012b). Однако следует помнить о том, что бактерии Acholeplasma sp. могут быть возбудителями мастита (Каунтер (Counter), 1978 г.).

Mycoplasma sp. можно без труда выделить в диагностической лаборатории, так как первичное выделение патогенов мастита осуществляется обычно по методу посева в кровяном агаре с инкубацией в течение 1–2 дней в присутствии 5% CO2. Сравнительно небольшое количество лабораторий можно оборудовать для обнаружения данной группы патогенных микроорганизмов (Биддл (Biddle) и др., 2005 г.). Действительно, в статье под редакцией Николаса (Nicholas) (Николас и др., 2007 г.) отмечается, что микоплазменный мастит зачастую не диагностируется в силу сложностей, связанных с выделением бактерий Mycoplasma sp. Таким образом, случаи, описанные в настоящей работе, очевидно, отражают проблему, которая является более серьезной, чем кажется.

Распространение Mycoplasma sp. в организме и между животными

Экспериментальное заражение

Наверное, один из первых докладов о последствиях экспериментального заражения скота бактериями Mycoplasma sp. был сделан группой ученых под руководством Джайна (Jain). В проведенном ими исследовании четыре коровы голштино-фризской породы были инокулированы различными штаммами молликутов. Два из них были штаммами бактерий, вызывающих мастит, один был выделен из тканей влагалища и предположительно содержал микроорганизмы M. bovigenitalium, а четвертый — бактерии A. laidlawii.

Один из штаммов бактерий-возбудителей мастита инокулировали в участки вымени 3 коров, что привело к развитию интрамаммарной инфекции как в инокулированных участках, так и в неинокулированных. Кроме того, через несколько дней после введения этот штамм Mycoplasma sp. был обнаружен в крови, носовой слизи, на слизистых оболочках глаз, влагалища и в прямой кишке. У одной из инокулированных коров родилась телочка, зараженная бактериями этого штамма, т.к. они были выявлены на слизистых оболочках ее носа, глаз и влагалища. У одной из особей патогенным микроорганизмом оказалась поражена лишь неинокулированная четверть молочной железы на гомолатеральной стороне.

Изучалась иммунная реакция организма на эту инфекцию. Введение возбудителей в непораженную часть вымени оказалось успешным, несмотря на иммунную реакцию. Авторы убедительно доказали тот факт, что инфекция может передаваться от одного органа к другому и что иммунной реакции организма может быть недостаточно для предотвращения и/или прекращения развития заболевания. Джайн и его коллеги предположили, что распространение бактерий в организме имеет комплексный характер и может происходить не только через кровь, но и через лимфу.

Ученые подчеркнули значительное увеличение надвыменных и других лимфатических узлов. В целом авторы сделали ценные открытия, касающиеся реакции организма на интрамаммарный микоплазменный мастит и иммунной реакции после введения патогена. Они обнаружили, что после инфицирования молочных желез микоплазма может проникать в различные участки организма и что сила первичной иммунной реакции не позволяет предотвратить развитие заболевания. При возможной разработке вакцин для профилактики болезни следует учесть необходимость совершенствования средств иммунной защиты, которые не являются антителопосредованными.

Естественное заражение

Распространение возбудителя мастита Mycoplasma sp. внутри стад и между ними недавно также стало предметом изучения. Джорджевич и его коллеги в 2001 г. описали генетическое многообразие и пути распространения микроорганизмов группы 7 Mycoplasma species КРС, которыми были заражены особи 3 соответствующих молочных стад. Бактерии группы 7 Mycoplasma species КРС не были выделены в особый вид (Мансо-Силва (Manso-Silva) и др., 2007 г.). 2007 г.).

По всей видимости, характеристики этой группы микоплазм не были четко определены, а их отдельные известные свойства оказались очень схожими со свойствами других видов, и это затрудняло точную таксономическую классификацию данной группы. В своей статье Мансо-Силва и его коллеги предположили, что группу 7 Mycoplasma species КРС можно отнести к подвиду M. capricolum.

Позднее эти ученые предложили другие варианты классификации, которые рассматриваются в настоящее время. В докладе Джорджевича и его коллег (2001 г.) отмечается, что бактерии группы 7 Mycoplasma species КРС были выделены из тканей различных участков тела здоровых и больных животных. В частности, исследователи выяснили, что указанные микроорганизмы провоцируют развитие у скота мастита, полиартрита и пневмонии, а также могли стать причиной выкидышей, зарегистрированных на 3 различных молочных фермах в течение 15 месяцев. Эти фермы принадлежали одному производителю.

Ученые изучили гетерогенность изолятов группы 7 Mycoplasma species КРС путем генетического анализа и сравнили ее с гетерогенностью изолятов, выделенных другими исследовательскими группами в различных регионах мира. Изоляты с той фермы, где наблюдались множественные выкидыши, было невозможно распознать. Данные микроорганизмы были выделены из различных участков организма, в том числе из суставов, перикардиальной жидкости, лимфатических узлов, желудка и селезенки, а также из молока. Изоляты из тканей плодов тоже были неотличимы.

Это же было установлено и для изолятов, полученных из молока и суставов через 18 месяцев после первой вспышки. Авторы показали, что анализ первичной структуры нуклеиновых кислот путем фингерпринтинга позволяет с легко определить источник изолятов, поскольку изоляты, полученные от коллег из разных стран мира, отличались от тех, которые были выделены во время вспышки заболевания в Австралии.

В этом докладе наглядно продемонстрирована способность одного клона Mycoplasma sp. КРС поражать и вызывать заболевание в различных частях организма, при этом один штамм провоцирует развитие инфекции у особей всех возрастов на протяжение нескольких месяцев.

 Таким образом, открытия, сделанные ранее в ходе эксперимента научной группой под руководством Джайна относительно попадания бактерий в различные области организма после поражения молочных желез, получили подтверждение в рамках полевого исследования (Пуньяпорнвитхайя и др., 2010 г.) при помощи методов молекулярной биологии и фингерпринтинга. В 2005 г. Биддл и его коллеги сообщили об особенностях распространения Mycoplasma sp. внутри организма, установленных на примере 7 коров, страдавших маститом в клинической форме. Изоляты Mycoplasma sp. были идентифицированы по методу фингерпринтинга так же, как в исследовании Джорджевича (2001 г.). Ежедневно на протяжение 28 дней осуществлялся отбор проб молока.

Перед убоем еженедельно в течение 4 недель собирали материал слизистых поверхностей ноздрей, глаз, ушей, влагалища и прямой кишки для бактериологического анализа. Затем после убоя у всех коров взяли материал для анализа.

Образцы тканей были взяты из паренхимы молочных желез и надвыменных лимфатических узлов, глоточных миндалин, заглоточного пространства, главных бронхов, бронхов третьего порядка, легочной паренхимы, синуса, носовых раковин, плевры, лимфоузлов бронхов, влагалища и ямки преддверия влагалища, субуретрального дивертикула, конъюнктивы, мочевых пузырей, коленных и скакательных суставов, перикарда, лимфоузлов кишечника, селезенки и евстахиевых труб.

Все материалы и ткани были инкубированы для выделения Mycoplasma sp., после чего хроматографические карты всех изолятов были сопоставлены. В организме одной коровы хроматографические карты всех изолятов, выделенных из паренхимы молочных желез, были такими же, как у возбудителей мастита. Наибольшая гетерогенность наблюдалась у изолятов дыхательной системы. Однако если 90% изолятов, выделенных из тканей дыхательных органов до убоя, имели такие же хроматографические карты, как и у изолятов молочных желез, то в образцах тканей, взятых после убоя, менее 25% хроматографических карт были идентичны. Хроматографические карты всех изолятов, полученных из тканей мочеполовой системы, и изолятов возбудителей мастита оказались одинаковыми, и более 90% всех остальных изолятов имели хроматографические карты, сходные с хроматографическими картами изолятов, выделенных из молока.

Данные, полученные в ходе исследования, подтвердили предположение о том, что бактерии Mycoplasma sp., вызывающие развитие мастита, могут распространяться в организме, проникая в ткани разных органов. Кроме того, было доказано, что в организме могут присутствовать и другие типы изолятов, тем не менее большая часть изолятов все же принадлежит к одному типу. Исключение составляет дыхательная система.

Однако ни в этом исследовании, ни в работе группы Джорджевича (2001 г.) не рассматривается направление распространения. По-прежнему не ясно, проникает ли Mycoplasma sp. в ткани других органов через железы или же центр колонизации или инфекции возникает на экстрамаммарных участках. Кроме того, не изучен механизм переноса инфекции между коровами, начинается ли заражение с респираторного заболевания одной коровы, и возбудитель передается к другому животному, попадая на экстрамаммарный участок его организма и проникая в ткани молочных желез, где вызывает развитие мастита. Данные, полученные Джайном и его коллегами в ходе эксперимента, указывают на возможность проникновения бактерий из тканей молочных желез на экстрамаммарные участки.

Полевые исследования дают факты, подтверждающие, что вспышки микоплазменного мастита могут провоцироваться бессимптомными носителями. В одной из работ отмечается случай вспышки микоплазменного мастита во время сухостойного периода. Мастит, вызываемый бактериями Mycoplasma bovigenitalium, поразил 16 из 99 коров, причем сначала он был диагностирован у тринадцати сухостойных коров и у одной коровы в околородовый период (Джексон (Jackson) и Боутон (Boughton), 1991 г.).

Объяснить перенос возбудителя от коровы к корове, с вымени одной особи на вымя другой в сухостойный период затруднительно. В статье, написанной группой ученых под руководством Маки (Mackie) (2000 г.), описывается вспышка микоплазменного мастита у коров в околородовой период со смешанным заражением M. californicum и M. canadense.

Допустив, что в мочеполовых путях могут находиться оба патогена, исследователи предположили, что источником мастита стала не первичная интрамаммарная инфекция. Полученные ими сведения могут указывать на то, что бессимптомный перенос совпал или, вероятно, предшествовал заражению молочных желез.

Ранее эта исследовательская группа сообщила о вспышке мастита в результате системного распространения микоплазм (Маки и коллеги, 2000 г.). В статье Джаспера и др. (1966 г.) также отмечается, что в одном из стад, где была зафиксирована вспышка микоплазменного мастита, коровы также страдали от микоплазменного артрита, и это дает основания предположить системный характер распространения возбудителя инфекции.

Кроме того, у некоторых коров клинические признаки мастита не проявлялись, однако в их молоке был зарегистрирован повышенный уровень Mycoplasma sp. и лейкоцитов. Согласно последним данным, полученным в ходе исследований на португальских фермах и приведенным в работе Пинхо и его коллег (2012 г.), результаты калифорнийской пробы на мастит у 20% коров с микоплазменным маститом молочных желез были отрицательными. Это указывает на то, что лишь у небольшой части коров, страдающих микоплазменным маститом, могут развиваться другие заболевания в бессимптомной форме.

В статье Уилсона и его коллег (2007 г.) описывается вспышка микоплазменной инфекции у коров первой лактации замкнутого коммерческого молочного стада. Исследование началось после того, как в Ветеринарную диагностическую лабораторию были отправлены материалы коровы первой лактации голштинской породы, у которой выявили полиартрит.

В ходе послеубойного осмотра в организме этого животного были обнаружены бактерии Mycoplasma sp. После осмотра стада и беседы с владельцем фермы было установлено, что 8 других коров первой лактации были поражены артритом, 3 из 9 больных коров умерли от пневмонии и 3 коровы страдали маститом в клинической форме.

В тканях больных животных были выявлены Mycoplasma sp. Инфекция поразила только 9 коров первой лактации и не затронула остальных особей стада. Имеются и другие сообщения, отмечающие связь между маститом и артритом (Хулихэн (Houlihan) и др., 2007 г.). В одном из стад в 120 дойных коров постоянно фиксировались вспышки артрита, тем не менее у некоторых особей, страдавших от этой болезни, наблюдались выкидыши, спровоцированные действием M. bovis, а также выделения из носа.

После вспышки артрита отмечались случаи мастита, вызванного M. bovis. Для другого стада органической молочной фермы (84 особи) были характерны вспышки мастита, при этом некоторые коровы заболевали артритом. Регулярно болевшие коровы выбраковывались, и этот способ борьбы с инфекцией оказался действенным. Описанные факты убедительно подтверждают предположение о том, что вспышки микоплазменного мастита, как правило, сопровождаются возникновением других заболеваний, вызываемых этим возбудителем (Хулихэн и др., 2007 г., Уилсон и др., 2007 г., Джаспер и др., 1966 г., Маки и Финли (Finlay), 2000 г.; Маки и др., 1986 г.). В работе Уилсона и его коллег (2007 г.) сообщается, что развитие мастита сопровождалось появлением хромоты, и это, вероятно, свидетельствует о том, что инфекция переносится внутри организма от одного участка (в данном случае, очевидно, экстрамаммарного) на другой (маммарный).

Кроме того, научная группа Уилсона обнаружила, что болезнь, вызываемая этим возбудителем, может быть эндемичной для стада при условии, что она возникает в замкнутом стаде и поражает определенную группу родственных животных. В целом полученные данные указывают на то, что лактирующие особи могут быть переносчиками заболеваний, затрагивающих несколько участков организма. Однако имеются сведения о том, что телята могут быть поражены этим возбудителем или выступать в качестве его бессимптомных носителей.

Бактерии Mycoplasma sp. попадают в организм теленка, размножаясь, главным образом, на слизистой поверхности ноздрей. В 1977 г. Беннетт (Bennett) и Джаспер изучили механизм переноса возбудителя назальным путем молодняком в здоровых стадах и стадах, пораженных микоплазменным маститом. Ученые отмечают почти шестикратную вероятность обнаружения бактерий в носовых каналах внешне здоровых телят из стад, где диагностирован микоплазменный мастит. Mycoplasma sp. были выделены у 6% телят из здоровых стад. Очевидно, эти данные говорят о том, что телята с большой долей вероятности могут быть бессимптомными носителями этого возбудителя и что такой перенос является одной из форм распространения инфекции в стаде.

Также высока вероятность присутствия телят-переносчиков в стадах, где детеныши находятся на молочном вскармливании. В статье Лэттера (Latter), Спрингера (Springer) и их коллег (1982 г.) отмечается, что в 80% стад 19% телят переносили бактерии Mycoplasma sp. в ноздрях, при этом у животных не проявлялись признаки респираторных заболеваний. Таким образом, молодняк в молочных стадах может быть бессимптомным носителем инфекции либо заражаться ею.

В докладе группы ученых под руководством Хама (Hum) (2000 г.) описывается вспышка мастита, полиартрита и выкидышей, вызванных микроорганизмами группы 7 Mycoplasma species КРС, в 3 молочных стадах, принадлежавших одному владельцу. В каждом стаде содержалось около 1000 лактирующих коров. Телят отлучали от маток в течение 24 часов с момента рождения и кормили молозивом.

В возрасте 3 дней телят из всех 3 хозяйств перемещали на одну ферму. Микоплазменная инфекция, проявившаяся в форме полиартрита, была впервые зарегистрирована у телят примерно двухнедельного возраста. Около трети всех телят на предприятии по выращиванию были поражены болезнью, большинство из них подверглось выбраковке или погибло. На одной ферме зафиксировали увеличение случаев выкидышей, которые предположительно могли быть спровоцированы действием бактерий группы 7 Mycoplasma species КРС.

В молоке коров с клинической формой мастита и в пробах, взятых из емкостей для хранения молока, были выявлены микроорганизмы группы 7 Mycoplasma species КРС. Позднее (Джорджевич и др., 2001 г.) ученые выяснили, что хроматографические карты изолятов группы 7 Mycoplasma species КРС были неотличимы и поэтому могли происходить от одного и того же клона. Однако из молозива изолятов Mycoplasma sp. никогда не выделяли.

Хам и его коллеги в своей статье (2000 г.) предположили, что источником инфекции было молозиво, которым кормили телят, и что возбудитель постоянно присутствовал в стаде, поражая других животных. Учитывая, что телята заболевали в раннем возрасте, именно это, по всей видимости, могло быть причиной. Однако учитывая, что эти микроорганизмы не были обнаружены в молозиве, а также что именно они могли провоцировать выкидыши и таким образом заражать половые пути, возможны и другие объяснения.

Может быть, бактерии группы 7 Mycoplasma species КРС попадали в организм теленка или телят в процессе отела и передавались другим детенышам на предприятии по выращиванию телят. Как бы то ни было, телята становились переносчиками заболевания, возбудитель которого распространялся среди взрослых особей. В 2010 г. Пуньяпорнвитхайя и его коллеги описали вспышку микоплазменного мастита в стаде без истории болезни. Теленок с пневмонией был выбракован за месяц до выявления первой коровы с микоплазменным маститом. Почти одновременно с первым случаем микоплазменного мастита был зафиксирован второй случай микоплазменной пневмонии у теленка. В легочной ткани этого теленка был выделен изолят Mycoplasma bovis.

Теленок и корова были выбракованы. Вскоре после этого выявили вторую корову с микоплазменным маститом. Это стало толчком для начала расследования. У всех животных фермы взяли для анализа материал слизистых поверхностей (ноздрей, глаз, ушей и влагалища). Кроме того, у всех лактирующих коров взяли пробы молока. Было обследовано 163 особи, и микроорганизмы Mycoplasma bovis были обнаружены у 72 из них, главным образом в ноздрях (57 случаев). Результаты анализа культур, собранных со слизистых поверхностей, показали, что телята в большей степени могли быть переносчиками клона Mycoplasma bovis, вызвавшего эндемическое заболевание в стаде, чем коровы.

Во время первого обследования стада была выявлена одна корова с признаками микоплазменного мастита. Хроматографические карты хромосомного анализа на основе электрофореза были неотличимы, что позволило предположить, что все животные были носителями одного клона. Аналогичные обследования стада проводились каждые три месяца в течение года. В этот период были выявлены два новых случая микоплазменного мастита, однако число установленных носителей Mycoplasma sp. в стаде было меньше 10%, причем обнаруженные штаммы Mycoplasma sp., как правило, отличались от исходного. За последние 6 месяцев не зафиксировано ни одного нового случая микоплазменного мастита.

Процесс переноса этих бактерий и заражения ими, по-видимому, остановился сам по себе и практически прекратился в стаде. Результаты анализа материала слизистых поверхностей коров на наличие Mycoplasma sp. перед проявлением признаков микоплазменного мастита были отрицательными. Таким образом, бессимптомный перенос не предшествует маститу. В целом этот случай доказывает, что бактерии микоплазмы, вызывающие мастит, могут колонизировать многие экстрамаммарные участки организма, сохраняясь на протяжение нескольких месяцев в замкнутом стаде, а переносчики не представляют угрозы для стада, что подтверждается небольшим количеством случаев вспышек мастита.

Недавно были опубликованы две статьи, в которых также приводятся аргументы в пользу того, что возбудитель микоплазменного мастита может размножаться в организме теленка и, используя его в качестве носителя, передаваться лактирующим коровам. Так в работе под редакцией Роя (Roy) (2008 г.), сообщается о выявлении на ферме Университета Ветеринарной службы Монреаля семинедельной телочки с септическим артритом левой плюсны. В ходе полного физического осмотра у животного было обнаружено воспаление задней правой четверти вымени. Изоляты Mycoplasma bovigenitalium были выделены в воспаленной четверти вымени, а не в плюсне. В слизистой ноздрей были выявлены Mycoplasma arginini, при этом результаты анализов других участков организма на наличие Mycoplasma sp. оказались отрицательными.

Матка телочки не болела микоплазменным маститом, так же как и другие особи стада, что было установлено по результатам еженедельных анализов на посев культур проб, взятых из емкостей для хранения молока.

Теленка оставили в стаде, и септический артрит и мастит прошли без лечения. Авторы делают вывод о том, что инфицированные телята могут играть роль в эпидемиологии мастита в стаде, хотя в данном конкретном случае заболевание не представляло угрозы для теленка или других особей этого стада. Все это четко указывает на то, что телята могут выступать в качестве переносчиков возбудителей микоплазменного мастита. В другой недавно вышедшей работе (Фокс (Fox) и др., 2008 г.) описана вспышка интрамаммарного заболевания, вызванного Mycoplasma sp., у телочек голштинской породы до полового созревания. На двух фермах было проведено обследование трех телочек, на молочных железах которых имелись узелки. Эти узелки были обнаружены штатным ветеринаром во время вакцинации и удаления добавочных сосков.

В жидкости из тех четвертей вымени, где находились узелки, присутствовали Mycoplasma sp., которые также были выделены в образцах тканей органов, асептически взятых у телят после убоя. Штаммы были идентифицированы как Mycoplasma bovis и изучены метод фингерпринтинга. Ученые взяли для исследования материал слизистых поверхностей доступных участков тела маток этих телочек и в одном случае — сверстницы матки, которая была выбракована, а также образцы молока и крови. Изоляты, выделенные в тканях дыхательных органов и молочной железы одного теленка, имели одинаковые хроматографические карты, полученные в рамках хромосомного анализа. Эти карты были также идентичны хроматографическим картам изолятов, выделенных в молоке коровы из стада, зараженного маститом.

В другом стаде в крови и молоке матки выявили M. bovis того же штамма, который обнаружили в молочной железе телочки. В целом данные указывают на вероятность того, что коровы и телята в стаде могли быть переносчиками M. bovis. Передача возбудителей через кровь подтверждается фактом их присутствия в крови матки одной из телочек. В этом случае Mycoplasma bovis попали в молоко данной коровы, хотя ее вымя было здоровым и не имело повреждений, и ее продуктивность за 305 дней лактации (в возрастном эквиваленте) составила 12 274 кг молока, а количество соматических клеток было стабильно меньше 100 000 клеток в миллилитре молока. Поскольку матка была симптомным носителем, а заболевание проявилось у теленка в раннем возрасте, наиболее правдоподобным объяснением будет то, что переносчиком возбудителя стала сама корова. Аналогичным образом, в другом стаде было установлено, что корова с маститом была заражена тем же самым клоном M. bovis, что и теленок, и этот клон колонизировал или поразил несколько участков организма теленка.

Опять же наиболее вероятно, что в этом стаде носителями возбудителя были взрослые животные. Данные описанного исследования также подчеркивают, что не все изоляты Mycoplasma sp., выявленные в собранных для анализа материалах, имели одинаковые хроматографические карты. Следовательно, в стаде может одновременно существовать несколько штаммов Mycoplasma sp., способных вызвать мастит. Наконец, узелки молочных желез телочек могли быть заражены Mycoplasma bovis до момента ветеринарного осмотра и вакцинации.

Такие инфекции могли бы подвергнуть стадо риску, когда эти телочки вступили бы в период лактации. Ни в одном из указанных исследований не рассматривается вопрос о способах борьбы с микоплазменным маститом. Сведения, приведенные в настоящей статье, указывают на то, что возбудители заболевания могут присутствовать в стадах на протяжение месяцев и бессимптомно распространяться коровами и телятами. В исследовании 18 стад, где наблюдались новые случаи возникновения микоплазменного мастита (Пуньяпорнвитхайя и др., 2012 г., в печати), мы попытались выделить основные методы борьбы, применение которых позволило бы предотвратить вспышку этой инфекции.

В большинстве стад в течение 1 месяца никаких признаков микоплазменного мастита обнаружено не было. Отсутствует какие-либо факты, подтверждающие преимущества приоритетной выбраковки в борьбе с микоплазменным маститом, т.к. число Быстро выздоравливавших стад, т.е. стад, в которых микоплазменный мастит был, по-видимому, ликвидирован, равномерно распределялось между приоритетной и неприоритетной выбраковками, а в отношении всех Медленно выздоравливавших и Невыздоравливавших стад, т.е. таких, в которых ликвидация инфекции занимала больше 1 месяца, применяли приоритетную выбраковку. Техника гигиены во время доения несколько различалась в стадах и, следовательно, для периода выздоровления не было характерно применение какой-либо особой техники. Следовательно, проверка и приоритетная выбраковка коров с микоплазменным маститом вряд ли ускорят наблюдаемую ликвидацию микоплазменного мастита в стаде, которая определяется путем анализа проб из емкостей для хранения молока.

Владельцам молочных ферм и их ветеринарным специалистам следует рассмотреть значение выбраковки коров, зараженных микоплазменным маститом, как одного из методов борьбы с инфекцией. Рекомендуется контроль статуса микоплазменного мастита путем анализа на посев проб из емкостей для хранения молока. Используя материалы второго исследования, мы изучили роль лазаретов для больных животных для борьбы с клинической формой микоплазменного мастита (Пуньяпорнвитхайя и др., 2012 г.). Общий коэффициент заболеваемости микоплазменным маститом в лазарете почти в 100 раз превышал аналогичный показатель для преддоильных площадок.

Лазарет был изобретен для изолирования коров, больных микоплазменным маститом, для того, чтобы не допустить заражения здоровых особей. Известно о 3 случаях вспышки микоплазменного мастита, когда коровы с подтвержденным диагнозом помещались в лазарет и передавали своих патогенов коровам, у которых были выявлены клинические признаки мастита и, следовательно, для которых имелась вероятность заражения микоплазменным маститом, хотя изначально они не были инфицированы им. 10-дневный интервал между отбором проб и получением результатов анализа на посев послужил причиной повышения заболеваемости микоплазменным маститом. Бессимптомное развитие интрамаммарной микоплазменной инфекции могло начаться у коров до их перемещения в лазарет и затем перерасти в клинический мастит, однако данные нашего исследования позволяют предположить, что в лазарете могли быть зафиксированы новые случаи микоплазменного мастита, и увеличение количества особей с клиническим микоплазменным маститом способствовало распространению инфекции в загоне.

Через три месяца после создания лазарета было зафиксировано меньше новых случаев микоплазменного мастита, поэтому, возможно, организация лазарета позволила более эффективно бороться с этим заболеванием. Однако для того чтобы определить, способствует ли создание лазаретов распространению и/или ускорению передачи микоплазменного мастита, необходимо провести дополнительные исследования с включением большего числа стад.

Последние случаи: Доклад. Следует отметить, что автор недавно изучал вспышки микоплазменного мастита в двух стадах. Первое стадо в 150 голов принадлежало Университету штата Вашингтон, и в нем на протяжение 25 лет не было зарегистрировано ни одного случая микоплазменного мастита, о чем говорят результаты анализа на посев проб из емкостей для хранения молока. После получения первого положительного результата у всех коров, пораженных клиническим маститом, и у всех коров, которые недавно перенесли это заболевание, были взяты пробы молока, и проведено их исследование на посев. По итогам анализа на посев этих проб ни одной коровы с микоплазменным маститом выявить не удалось. Затем пробы молока были взяты у всех лактирующих коров и исследованы на посев, и была обнаружена особь с микоплазменным маститом в бессимптомной форме. Эта корова оставалась в дойном стаде примерно в течение 10 дней и потом была изолирована; ее молоко вылили после диагностирования болезни.

Выявив инфицированную корову, ученые взяли материал слизистой носа у всех животных молочной фермы, и оказалось, что 54/353 (15,3%) всего молодняка и взрослых особей были переносчиками бактерий того же штамма M. bovis, который вызвал развитие мастита в бессимптомной форме. Однако больше ни одного случая микоплазменной инфекции не было зарегистрировано, и новые вспышки мастита не возникали.

После выбраковки коровы с бессимптомной формой заболевания микоплазменный мастит в стаде не проявлялся. Другая вспышка инфекции произошла в коммерческом стаде примерно в 500 голов, ученые определили, что 47 из 166 случаев клинического мастита были спровоцированы M. bovis. Новые случаи микоплазменного мастита в стаде фиксировались в течение 2 месяцев. Больных коров выбраковывали из коммерческого стада вскоре после их выявления. В начале вспышки инфекции телята и коровы страдали от полиартрита и имели густые носовые выделения.

В ходе анализа в суставной жидкости и носовой слизи были обнаружены бактерии M. bovis. Вспышка была признана завершившейся после получения отрицательных результатов анализов на посев проб из емкостей для хранения молока и нерегистрации новых случаев микоплазменного мастита в течение одного месяца. Недавно были получены сведения о том, что после затишья в этом стаде были выявлены новые случаи клинического микоплазменного мастита, хотя не столь серьезные, как в первый раз.

Соблюдение техники гигиены во время доения сильно различалось в двух стадах. Стадо Вашингтонского университета имело четкую методику борьбы с контагиозным маститом, что подтверждалось малым числом соматических клеток в молоке (в среднем меньше 150 000 клеток в миллилитре молока), а также отсутствием Streptococcus agalactiae и низким уровнем Staphylococcus aureus (стабильно ниже 3%). В коммерческом стаде, напротив, количество соматических клеток в емкостях для хранения молока, как правило, превышало 300 000 клеток на миллилитр, и имело случаи контагиозного мастита в анамнезе.

Понятно, что штамм M. bovis распространялся в стаде Вашингтонского университета, поразив более 15% особей, что подтверждается результатами анализа материала носовых каналов этих бессимптомных носителей. Тем не менее ни одного нового случая мастита не было зафиксировано. В коммерческом стаде борьба с контагиозным маститом носила показной характер; болезнь распространялась в лактирующем стаде в форме мастита. В технику гигиены во время доения не были внесены какие-либо изменения, и развитие инфекции пытались остановить при помощи выбраковки.

Безусловно, мы не можем сделать какие-то определенные выводы, опираясь на истории этих двух стад, однако хотя штамм M. bovis передавался между особями в обоих стадах, разные последствия, как кажется, могли быть связаны с особенностями техники гигиены во время доения и методики борьбы с контагиозным маститом.

В стаде Вашингтонского университета больная корова подверглась выбраковке, тем не менее, к моменту выбраковки возбудитель распространился среди всех возрастных групп животных фермы, и более 15% особей стало его бессимптомными носителями. Следовательно, можно утверждать, что выбраковка была, вероятно, необязательна в случае Вашингтонского университета, поскольку инфекция уже получила широкое распространение.

В коммерческом стаде, владелец/оператор которого не внес никаких корректив в методику борьбы с контагиозным маститом, за исключением селекционной выбраковки коров с микоплазменным маститом, степень распространения инфекции в конечном счете сократилась, однако возбудитель не был ликвидирован. Возможно, выбраковка животных, пораженных микоплазменным маститом, позволяет ослабить передачу. Однако для контроля развития заболевания, вызываемого M. bovis, и колонизации этого микроорганизма в стаде простой выбраковки особей, больных микоплазменным маститом, не достаточно.

Опыт изучения предыдущей вспышки, сопровождавшейся выбраковкой животных с клинической формой микоплазменного мастита и другими микоплазменными инфекциями, показывает, что распространение микроорганизмов происходит быстрее, чем выбраковка.

В том случае первым клиническим проявлением микоплазменной болезни стала пневмония у телят, затем инфекция приняла форму мастита у коров и артрита у телят, поразив в общей сложности 8 особей, и в десять раз больше животных стали бессимптомными переносчиками штамма, вызвавшего клиническое заболевание (Пуньяпорнвитхайя и др., 2010 г.).

В вышерассмотренном докладе ставится под сомнение значение выбраковки как универсального средства борьбы с микоплазменным маститом (Пуньяпорнвитхайя и др., 2012 г.). Понятно, что в обоих стадах широкое распространение M. bovis, произошедшее до выбраковки, не могло не иметь последствий. В стаде Вашингтонского университета отличное соблюдение гигиены во время доения помогло существенно сократить распространение бактерий и ограничить развитие мастита одной особью.

Но так же очевидно, что возбудитель распространился во всех помещениях для содержания скота на ферме, поскольку значительное число особей бессимптомно переносило его в носовых путях. В коммерческом стаде инфекция затронула как телят, так и коров, вызвав заболевание, отличное от мастита, и такое распространение произошло до применения выбраковки. Так что же сократило степень переноса M. bovis? Несмотря на то, что возбудитель, по-видимому, получил широкое распространение на обеих молочных фермах, поразив телят и коров, выявлен он был лишь у небольшого количества особей.

Гораздо больше животных были поражены бессимптомно, но распространяли инфекцию до выявления, либо оказались не чувствительны к переносу и/или заболеванию. Если последнее верно, то выбраковка коров могла бы снизить риск воздействия возбудителя на других животных, подверженных ему. Однако также имеется вероятность генетических изменений заражающего штамма с течением времени. Этот вопрос более подробно рассматривался в описании клинического случая (Пуньяпорнвитхайя и др., 2010 г.).

С другой стороны, у животных стада мог сформироваться особый иммунитет, либо прекращение вспышки могло быть связано с генетическим изменением штамма M. bovis под действием иммунной реакции.

Заключение

Микоплазменный мастит сложно диагностировать. Он остается проблемой молочного скотоводства во всем мире. В последних материалах приводятся сведения о том, молодняк может выступать в качестве бессимптомного или, вероятно, симптомного переносчика штамма, вызывающего мастит в стаде.

Данные позволяют предположить, хотя и неокончательно, что штаммы, вызывающие мастит, передаются телятам от маток, как показано в работах Джорджевича и его коллег (2001 г.), а также научной группы Фокса (2008 г.).

Степень переноса микоплазмы коровами и телятами может быть велика во время вспышки, снижаться с течением времени и, следовательно, не может провоцировать развитие нового заболевания — мастита (Пуньяпорнвитхайя и др., 2010 г.).

Отделение коров, пораженных микоплазмой, путем изоляции, например, в лазарете, или выбраковки, как выяснилось, не способствовало предотвращению появления новых фактов микоплазменного мастита в ряде описанных случаев. При этом другие материалы подтверждают эффективность выбраковки как первичного способа борьбы с микоплазменным маститом.

Возникновение инфекции после привоза скота в стадах, в которых хорошо соблюдается техника гигиены во время доения, может объясняться тем, что эти меры по вмешательству не предусматривали изоляцию определенного числа особей-бессимптомных носителей, что позволило бы ликвидировать очаг заболевания. Возможно, у КРС вырабатывается иммунитет против возбудителя, достаточно сильный для того, чтобы со временем остановить развитие инфекции.

Возбудители Mycoplasma sp. в целом, и M. bovis в частности, относятся к высоко инфекционным, и основные методы борьбы должны быть направлены на поддержание общего здоровья скота при помощи питания и создания соответствующих условий содержания, а также на снижение риска воздействия новых штаммов путем тщательного контроля того, как и когда скот вводится в стадо.